一、 产品规格与技术参数指标
本服务共计包含**个独立组织样本的全流程实验及测序分析。中标方须严格满足以下各项高精度指标:
*.* 前期样品处理、切片与透化质控
组织处理与包埋:负责对采购方提供的组织样品进行截取,完成高规格组织 *** 梯度包埋(或相应石蜡包埋),严禁出现冻融损伤、气泡或组织架构开裂。
高精度冷冻切片:采用超低温冷冻切片机连续切取目标部位,切片厚度精密控制在** μ* ± *μ*,须进行显微拍照确认及严格 ***质检。
石蜡包埋(****)样品要求:***** ***; **%。
冰冻(**/***包埋)样品要求:*** ***; *。
梯度透化与捕获时间测定:合格切片必须进行空间透化质检预实验,通过测定荧光强度,精准确定每组组织样本的最佳***捕获时间,并提供可溯源的梯度荧光报告。若因透化失误导致空间弥散或捕获数极低,中标方须全额赔偿并免费重做。
*.* 空间组学(芯片捕获与测序)参数
芯片规格与分辨率:必须采用原位芯片杂交捕获技术,芯片物理编码面积≥**** × ****。芯片探针间距(***距离)和点阵物理分辨率必须达到 ***** * ***** 的亚细胞/纳米级别。
控温参数自定义:控温系统范围须支持 *****℃ 自定义,原位反应运行时间支持 ***** *** 自定义,通量满足单张组织切片原位反应需求。
检测靶标与维度:单张切片检测尺寸兼容**** ~ ******,不限物种,支持 ****(石蜡)和 **(冰冻)样本类型;实现***和蛋白联合检测,指定靶标数不少于**个。
数据质量底线(***):
空间坐标与分子编码(***/***/*******)端 *** 碱基百分比必须≥ **%(或对齐高级别空间组学测序质量体系)。
*** 插入片段测序端 *** 碱基百分比必须≥ **%,且单个组织样本测序产出*** ****严格≥****。
文库质检硬性标准:**** 浓度***; ***/μ*,****主峰在*****左右。
*.* 空间代谢组学分析参数
空间原位检测:基于基质辅助激光解吸电离质谱成像(*********)或高分辨原位质谱检测技术,针对切片表面进行高分辨率空间代谢物/脂质原位定量与成像分析。
多组学空间配准:代谢组检测空间分辨率须与空间转录组切片完成多图层高精度重叠配准。
*.* 单细胞双端组学(***·**** 与 ***·******)测序
表观多组学联合:对目标关联组织样本进行解离,利用单细胞多组学平台分别构建 ***·****(染色质开放通路文库)和 ***·******(单细胞转录组文库)。单样本有效捕获的高质量细胞数/细胞核数≥ **** 个。
二、 数据分析与技术交付标准
中标方交付的数据分析报告及原始文件,必须对齐并完全涵盖以下多组学整合标准:
*.基础标准分析:图像自适应无损对准(精确到**μ*的单细胞识别级别)、空间信号点高保真解码、精密细胞分割、信号点原子级分配。
*.高级/个性化多组学分析:包含空间降维聚类分析、多细胞/单细胞**** ***(细胞分割)边界圈定、细胞类型注释、组间差异基因(***)表达及空间表达量热图/气泡图可视化。
*.定制化科学挖掘:针对特定病理/危害状态下的组织样本,进行空间表达谱的分子漂移变化轨迹分析;提供差异表达基因的 ** 功能富集、**** 信号通路富集网络拓扑图。
*.产权归属:在服务期内,利用实验和分析服务工作成果所完成的新的技术成果和数据,知识产权完全归采购方(甲方)所有,中标方不得用于公开发表或其他商业用途。
三、售后服务
*. 交付时效性:本项目时间紧迫,为保障项目敏捷推进,自提交合格组织样品起计算,标准常规测序数据及质控结果须在*个工作日内交付。
*. 无限重测与全额试剂赔偿:因组织样本具有极高珍稀性与不可复制性,若在切片、染色成像、组织透化、文库构建、或者上机测序中,因中标方技术员操作延迟、手法不当(如组织脱落、空间信号弥散、芯片堵孔、油滴破乳)或测序 *** 不达标,中标方必须无条件免费提供同等规格的全新原厂芯片和配套建库测序试剂进行重新实验,由此产生的所有连带芯片及试剂成本由中标方全额承担。